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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
多聚賴(lài)氨酸溶液 |
50ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85678 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人促睡眠肽(DSIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
核因子κB 48T/96T
豬去甲腎上腺素(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬心鈉肽(ANP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
聚集蛋白 48T/96T
大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
纖維蛋白原 β 48T/96T
小鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
多聚賴(lài)氨酸溶液人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 Human lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit
人普通急性白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒 Human common acute lymphocytic leukaemia antigen,CALLA ELISA Kit
人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒 Human CTX-2 ELISA Kit
人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA試劑盒 Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA Kit
小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒Mouse Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒Mouse dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA Kit
大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒Rat Calretinin,CR ELISA Kit
大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA Kit
豬球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒Porcine Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Duck Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
人包蟲(chóng)抗體IgG ELISA試劑盒 Human echinococcus antibody IgG ELISA Kit
LB Broth, Lennox
BactoTM瓊脂 *優(yōu)化有益的鈣鎂離子比例同時(shí)減少有害離子含量454g
BactoTM Agar
Plate Count Agar
m HPC瓊脂 高營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測(cè)中分離、計(jì)數(shù)異養(yǎng)或“富營(yíng)養(yǎng)”的細(xì)500g
平板計(jì)數(shù)瓊脂 高營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于分離、計(jì)數(shù)異養(yǎng)或“富營(yíng)養(yǎng)”的細(xì),水、廢水、食品、乳制品的細(xì)計(jì)數(shù)500g
m-HPC Agar
R2A瓊脂 低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于水檢測(cè)中分離生長(zhǎng)緩慢的“貧營(yíng)養(yǎng)”的細(xì)和對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較低的細(xì)500g
R2A Agar
D/E中和瓊脂 能中和抗微生物的化學(xué)試劑,用于環(huán)境標(biāo)本中檢測(cè)和計(jì)數(shù)表面微生物500g