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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
蛋白提取定量PAGE電泳試劑盒 |
50T/ 100T |
|
|
2-8℃ |
BH-D85596 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人高香草酸(HVA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體 48T/96T
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人保護(hù)素(CD59)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
綿羊瘦素(leptin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠乙酰膽堿(ACH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人錨蛋白(ankyrin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蛋白提取定量PAGE電泳試劑盒人微管相關(guān)蛋白2 規(guī)格: 48T MAP-2(Human microtubule-associated protein 2) ELISA Kit
人腫瘤標(biāo)志物 規(guī)格: 48T Human CA724 ELISA Kit
人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白 規(guī)格: 48T Bid(Human BH3 interacting domain death agonist) ELISA Kit
人丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶 規(guī)格: 48T ALT/GPT(Human Alanine Aminotransferase) ELISA Kit
人血管緊張素Ⅱ受體2抗體 規(guī)格: 48T AT2R-Ab(Human Angiotensin II Receptor 2 antibody) ELISA Kit
人抗白蛋白抗體 規(guī)格: 48T AAA(Human anti-albumin antibody) ELISA Kit
人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B 規(guī)格: 48T S100A9(Human S100 calcium binding protein A9/calgranulin B) ELISA Kit
人抗單核抗體 規(guī)格: 48T AMA(Human anti-Monocyte antibody) ELISA Kit
人腺病毒抗原 規(guī)格: 48T ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體 規(guī)格: 48T M-AChR(Human muscarinic acetylcholine receptor) ELISA Kit
人兒茶酚胺 規(guī)格: 48T CA(Human catecholamine) ELISA Kit
賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 5(g)
尿素瓊脂基礎(chǔ) 現(xiàn)貨促銷 250(g)
V-P半固體瓊脂 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
吲哚培養(yǎng)基(又名色氨酸肉湯) 現(xiàn)貨促銷 10(g)
丙二酸鈉培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 10(g)
GN增液 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 現(xiàn)貨促銷 10(g)
GN增液 現(xiàn)貨促銷 1000(g)
木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽培養(yǎng)基(XLD) 特價(jià)供應(yīng) 250(g)