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常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備:培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
產(chǎn)品名稱 |
NFκB-p65 Phospho-Thr254 Antibody |
規(guī)格 |
詳見說明 |
貨號(hào) |
BH-01S3905 |
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
試劑使用須知:
(1)請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行**操作。
(2)通常購(gòu)買試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對(duì)于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
(4)購(gòu)買后,請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng);做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),做好必要的**對(duì)策;對(duì)沒有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
人戊糖素(Pentosidine)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱:C6
鮭魚補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱:C6
人白三烯E4(LTE4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠Qa淋細(xì)胞抗原2(Qa-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠腎成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
NFκB-p65 Phospho-Thr254 AntibodyTRAIL 蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:25次
EGFR 蛋白表達(dá)流式 儀檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
載玻片 EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
冰凍切片組織EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
石蠟切片組織EGFR 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
大鼠磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MDA-MB-175VII(乳腺導(dǎo)管癌) 5×106cells/瓶×2
犬內(nèi)皮素1(ET-1)Elisa 試劑盒96T/48T試劑盒 MDA-MB-415(乳腺癌) 5×106cells/瓶×2
人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MDA-MB-436(乳腺癌) 5×106cells/瓶×2
小鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MDA-MB-468-06(乳腺癌) 5×106cells/瓶×2
鴨白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MFC-GFP(小鼠前胃癌(綠色熒光蛋白標(biāo)記)) 5×106cells/瓶×2
大鼠巨噬炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MPC-11(小鼠漿瘤) 5×106cells/瓶×2
綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MS751(**頸表皮癌) 5×106cells/瓶×2
人蛋白Z(Protein Z)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 NCI-H157(非小肺腺癌) 5×106cells/瓶×2
人硫酸類肝素(HS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 NCI-H1688(典型小肺癌) 5×106cells/瓶×2
小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 NCI-H205(腎上腺腺瘤) 5×106cells/瓶×2
人抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 NCI-H1703(肺鱗癌) 5×106cells/瓶×2