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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：人甲狀腺癌細(xì)胞 ；KMH-2 (STR)

  • 產(chǎn)品型號(hào)：P-X10553
  • 產(chǎn)品**：派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡(jiǎn)單介紹：
人甲狀腺癌細(xì)胞 ；KMH-2 (STR)公司正在出售的產(chǎn)品：小鼠雜交瘤細(xì)胞株；MA-4G8 小鼠雜交瘤細(xì)胞株； 跨膜蛋白SEMA4G Anti-SEMA4G FITC標(biāo)記的兔抗人IgG H&L F(ab')2 Rabbit Anti-Human IgG F(ab')? / FITC
詳情介紹：

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

人甲狀腺癌細(xì)胞 ；KMH-2 (STR)

英文簡(jiǎn)稱

規(guī)格

貨號(hào)

KMH-2

1×106

P-X10553

產(chǎn)品詳情：

細(xì)胞別稱；KMH-2;人甲狀腺癌細(xì)胞

種屬來源；人

年齡性別；男性，71歲

組織來源；甲狀腺未分化(間變性)癌

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；梭形細(xì)胞

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；該細(xì)胞是人甲狀腺未分化癌細(xì)胞（anaplastic thyroid carcinoma, ATC）。

STR位點(diǎn)；Amelogenin：X，Y；D5S818: 12,13；D13S317: 9；D7S820: 11；D16S539: 9,12；vWA: 14,15；THO1: 9；Amelogenin: X,Y；TPOX: 8,11；CSF1PO: 10,11

生物等級(jí)；1

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測(cè)；無

保藏機(jī)構(gòu)；中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)中心；JCRB; JCRB1066

培養(yǎng)基；90%DMEM+10%FBS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。


一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例：
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實(shí)驗(yàn)原理：

公司正在出售的產(chǎn)品：

S100A14/15抗體  Anti-S100A14

蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)  Anti-14-3-3 family protein

RhoA抗體  Anti-RhoA

豆蔻?；D(zhuǎn)移酶1抗體

乳腺癌細(xì)胞分化因子P45抗體 Heregulinβ  Anti-NRG1/HRG beta 1

嗅覺受體52W1抗體

鋅指蛋白288抗體  Anti-ZNF288/ZBTB20

Phospho-CEBP beta (Thr188 + Thr235)

NMT1

磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體

生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白7抗體

蛋白激酶C α抗體  Anti-PKC alpha

GRB7

4-磷酸磷脂酰肌醇5激酶1樣蛋白抗體  Anti-PIP5KL1/PIPKH

TIP30蛋白抗體  Anti-TIP30

OR52W1

大鼠β-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)相容蛋白(β-TrCP)elisa生化檢測(cè)試劑盒

WRCH1抗體  Anti-WRCH-1

β-TrCP ELISA Kit

泛素結(jié)合酶E2F抗體  Anti-NCE2

人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)elisa生化檢測(cè)試劑盒

環(huán)指蛋白149抗體  Anti-RNF149

MCAbELISAKit

分泌粒蛋白3抗體  Anti-SCG3/SgIII

小鼠天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)elisa檢測(cè)試劑盒

人載脂蛋白A1標(biāo)準(zhǔn)溶液

大鼠白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶4(IRAK4)elisa檢測(cè)試劑盒

人甲狀腺癌細(xì)胞 ；KMH-2 (STR)人α干擾素(IFN-α)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

半乳糖凝集素9C抗體

突觸后蛋白CRIPT抗體

LGALS9C

CRIPT

實(shí)驗(yàn)步驟：

1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板，轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。


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