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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:爪蛙神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)進口ELISA試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:PC110950
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
爪蛙神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)進口ELISA試劑盒檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
詳情介紹:

我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

爪蛙神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)進口ELISA試劑盒

英文名稱

Clawed frog Neurotrophin 3(NT3)ELISA Kit

貨號

PC110950

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。

樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

注意事項:

1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結果準確,每次檢測均需做標準曲線。
100mL RIPA裂解液(中) RIPA Lysis Buffer(M) -4℃保存

KEA瓊脂(不含糖) KEA Agar 250g

2 ug pECFP-Peroxi pECFP-Peroxi 低溫運輸,-20℃保存

三十醇 Triacontanol 593-50-0 20mg

B-半乳糖苷ONPG生化鑒定管 細生化鑒定 20支/盒

2 ug pCL Eco pCL Eco 低溫運輸,-20℃保存

莽草酸 Shikimic acid 138-59-0 20mg

100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4  DIPSO Buffer,0.2M,pH7.4  常溫保存

1 管 M15大腸桿 M15 E.coli Strain -80℃保存

氯化鎂孔雀綠肉湯(MM) Rappaport-Vassiliadis Medium 250g

2 ug pESC-HIS pESC-HIS 低溫運輸,-20℃保存

1瓶 Ehrlich細胞株 Ehrlich 低溫運輸和保存

爪蛙神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)進口ELISA試劑盒ELISA Kit for Hyaluronic acid 6.25-400 ng/mL小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人次黃嘌呤磷酸核糖基轉移酶1(HPRT1)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL人 F13B / Coagulation factor XIII B chain 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase 0.156-10 ng/mL食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人羥烷基-輔酶A脫氫酶,線粒體(HADH)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/ml人 CFD / Adipsin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human Hydroxyacyl-coenzyme A dehydrogenase, mitochondrial 0.156-10 ng/ml雪貂 CD4 / Leu-3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

HLAⅡ類組織相容性抗原DRβ5鏈(DRB5)ELISA試劑盒 1.56-100 ng/mL小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human HLA class II histocompatibility antigen, DR beta 5 chain 1.56-100 ng/mL小鼠 CTSL / Cathepsin-L 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人造血前列腺素D合成酶(H-PGDS)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL人 Epiregulin / EREG 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human Hematopoietic prostaglandin D synthase 0.312-20 ng/mL人 Arginase-1 / ARG1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人細胞質(zhì)組氨酰(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL小鼠 CFD / Adipsin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

操作流程:
1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
2)酶標板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

 

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