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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:鳥H5N1 IgG抗體ELISA試劑盒步驟

  • 產(chǎn)品型號:PB110948
  • 產(chǎn)品廠商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
鳥H5N1 IgG抗體ELISA試劑盒步驟檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
詳情介紹:

操作流程:
1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
2)酶標板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

鳥H5N1 IgG抗體ELISA試劑盒步驟

英文名稱

Bird influenza A virus subtype H5N1 IgG antibody ELISA Kit

貨號

PB110948

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。

樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

注意事項:

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
20次 Southern Marker DL2000(生物素)  

中國藍瓊脂培養(yǎng)基 用于腸道的弱選擇性分離。 250g

100mL AMPD Buffer,0.2M,pH8.0  AMPD Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

250mL 固相RNase劑 Surface RNase Erasol 常溫

50T 腮腺炎病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH7.0   MOPS Buffer,0.5M,pH7.0   常溫保存

30次 一站式DNA尿素-PAGE電泳套裝 One-Stop DNA Urea-PAGE Pack 4℃保存

7.5%氯化鈉肉湯瓶裝顆粒培養(yǎng)基 用于金黃色葡萄球和其它耐鹽的選擇性增培養(yǎng) 250g

10 mg DiI (細胞膜紅色熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

3%氯化鈉堿性蛋白胨水 3%Sodium Chloride Peptone Water 9ml*20支/包

2 ug pBudCE4.1-EGFP pBudCE4.1-EGFP 低溫運輸,-20℃保存

鳥H5N1 IgG抗體ELISA試劑盒步驟ELISA Kit for Human Somatotropin 31.2-2000 pg/mL人 PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人白細胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL小鼠 AGT / SerpinA8 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human HLA class I histocompatibility antigen, B-27 alpha chain 0.312-20 ng/mL小鼠 NTRK2 / TrkB 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human Hypoxia-inducible factor 1-alpha 0.156-10 ng/mL小鼠 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL小鼠 FCER2A / CD23 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Human High mobility group protein B1 0.156-10 ng/mL小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

高香草酸(Homovanillic acid)ELISA試劑盒 0.78-50 ng/mL雪貂 CD20 / MS4A-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ELISA Kit for Homovanillic acid 0.78-50 ng/mL人 F9 / FIX / Factor IX 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

組織胺(Histamine)ELISA試劑盒 7.8-500 ng/mL人 FST / Follistatin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 

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