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標準品的管理規(guī)范
標準品的管理規(guī)范:
一、接收
收到標準品后,應檢查外包裝是否完好密封,標簽是否清晰完整,并及時填好相關貯存記錄,記錄信息要完整無缺,至少要包括產(chǎn)品名稱、儲存條件、存入日期、保質期、規(guī)格、批號、含量、數(shù)量、瓶號以及備注信息等。
二、貯存
對于標準品的存放期間,要經(jīng)常性的核查標準品是否失效,對于怕光怕熱易揮發(fā)的標準品,是否密封實了,是否按照存放要求進行存放。
三、使用
采用登記制度,如需要取用,則需要填寫取用的產(chǎn)品名、對應的批號、數(shù)量、使用目的、取用人等相關詳細的信息,以明確責任主體,保證能夠查到標準品使用的來龍去脈。
四、銷毀
及時檢查基準標準品是否過期,如有過期,需要收集起來及時做銷貨處理。
1、 單克隆環(huán)法:此類方法多用于整合率低的轉染方法或者需要得到單克隆細胞株的實驗。其優(yōu)點在于工作量小,只需將轉染或者病毒載體感染后的細胞按照一定的細胞密度轉移至新皿中,并使用合適的藥wu 進行篩選,zui 后在克隆環(huán)的幫助下對單克隆細胞株進行挑選,并在新皿中完成擴增。
缺點在于需要對細胞密度和藥wu 濃度繪制致死曲線并選取合適的細胞密度和藥wu 濃度進行篩選,一些細小的密度和濃度差別都會導致難以獲取均一的單克隆,結果導致獲取的克隆不純,含有非整合的細胞。穩(wěn)定整合的細胞在這樣一類混合細胞中,很快會失去生長優(yōu)勢,zui 終導致失去穩(wěn)定株。
2、 96孔單克隆稀釋法:此類方法同樣多用于整合率低的轉染方法或者需要得到單克隆細胞株以及篩選懸浮細胞穩(wěn)定株的實驗。其優(yōu)點在于,理論上可以得到非常均一的單克隆,同時可以篩選懸浮細胞穩(wěn)定株。其缺點在于,工作量比較大。
3、 逆轉錄病毒混合克隆制備法:此類方法適用于需要制備混合穩(wěn)定株。
優(yōu)點在于可以在短時間內(nèi)(1周)獲得穩(wěn)定細胞株,同時也可以隨時將細胞稀釋轉移至新皿中獲得單克隆細胞株。缺點在于需要制備逆轉錄病毒載體。